簡要描述：產品名稱：illumina MiniSeq病毒基因測序試劑盒

產品貨號：FC-420-1003

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產品名稱：Miniseq High Output Reagent Kit（300-cycles）基因測序試劑盒

產品貨號：FC-420-1003

產品規格：

大輸出                         7.5 Gb（MiniSeq High Output Reagent Kit (300-cycles)）

每次運行的大讀數        高達2500萬

試劑類型                         簇生成，配對末端測序，合成測序

核酸類型                         DNA，RNA

系統兼容性                      MiniSeq

技術                                測序

產品介紹：

-illumina測序原理步驟:一、sample prep(樣本準備):基因文庫制備(一個基因組切斷再加接頭)二、cluster generaton(簇的形成):文庫在測序芯片(流動池flowcell)上不斷擴增，形成橋式PCR，再切掉反向鏈(reverse strand)，形成許多簇相同的正向序列(正向鏈forward strand)。Snipaste_2019-02-08_21-42-31.png image.png

三、sequencing(測序):熒光信號、可逆阻斷終止技術、Sequences-by-Synthesis

四、data analysis(數據分析)具體內容:

一、基因文庫:

image.png 接頭不僅含有與測序芯片上互補的序列，有時還有index序列，由于測序芯片的強大，一個芯片可以同時測許多樣本(動物、植物、微生物)，那如何區分測序數據來自哪個樣本呢?加標簽即加index序列，從而來區分不同的樣本。

二、橋式PCR:文庫種到測序芯片，并進行擴增的過程。

測序芯片:

Snipaste_2019-02-06_11-40-11.png

圖片發自簡書App 形成簇之后，加入帶不同熒光標記的dNTP(含有疊氮基團)和聚合酶，使得帶熒光標記的dNTP結合到測序鏈上，再進行激光掃描，得到熒光，推出結果。堿基結合到測序鏈并發出熒光信號的過程被稱為Sequences-by-Synthesis。

image.png

image.png 由于疊氮基團的存在(可逆阻斷終止技術)，一個循環只能延長一個堿基，即一個堿基結合到測序鏈上為一個循環，當結合上一個堿基后，把其他dNTP和酶用水沖掉，然后進行激光掃描，根據激光掃描顏色判斷是哪個堿基，根據互補原則反推出結果，再切掉疊氮基團，進入新的循環，加入新的dNTP和酶，再延長堿基，沖掉dNTP和酶，再激光掃描。讀取index(Barcode): 和讀取測序鏈一樣的原理，讀取的目的是為了確定樣本的來源。

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基因測序是一種新型基因檢測技術，能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列，預測罹患多種疾病的可能性，個體的行為特征及行為合理。基因測序技術能鎖定個人病變基因，提前預防和治療。

基因測序相關產品和技術已由實驗室研究演變到臨床使用，可以說基因測序技術，是下一個改變世界的技術 。

基因測序只是基因檢測的方法之一，其又叫基因譜測序，是上*的一種基因檢測標準。

基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創產前基因檢測。只需要采集孕婦的外周血，通過對血液中游離DNA(包括胎兒游離DNA)進行測序，并將測序結果進行生物學分析，從而得出胎兒是否患有染色體數目異常的疾病，包括常見的21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華氏綜合征)和13-三體綜合征(Patau綜合征)。

cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細胞特異表達的基因。但對真核細胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有內含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經過剪接、去除了內含子的cDNA。

真核生物基因組DNA十分龐大,其復雜程度是蛋白質和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發材料直接克隆目的基因的一個主要困難。

高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時間階段的單個細胞或個體中,都僅有15%左右的基因得以表達,產生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發的cDNA克隆,其復雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。

cDNA文庫在研究具體某類特定細胞中基因組的表達狀態及表達基因的功能鑒定方便具有特殊的優勢，從而使它在個體發育、細胞分化、細胞周期調控、細胞衰老和死亡調控等生命現象的研究中具有更為廣泛的應用價值，是研究工作中zui常使用到的基因文庫。

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