簡要描述：慢病毒滴度測定Lenti-X p24 Rapid Titer：
· ELISA法快速簡便測定病毒滴度
· 收集上清、裂解、結(jié)合、洗滌、測定
· p24衣殼蛋白質(zhì)含量關(guān)聯(lián)病毒滴度

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit 慢病毒滴度測定，ELISA法

慢病毒載體：慢病毒（Lentivirus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體。區(qū)別一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，它對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。

慢病毒滴度可以檢測慢病毒載體的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

Lenti-X™慢病毒滴度測定 p24 ELISA試劑盒

產(chǎn)品英文名稱：Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit 

產(chǎn)品中文名稱：慢病毒滴度測定 p24 ELISA試劑盒

通過標(biāo)準(zhǔn)的p24蛋白ELISA法快速測定慢病毒滴度。

慢病毒上清液與平板上包被的p24抗體相結(jié)合，采用生物素標(biāo)記的二抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素及顯色劑測定p24衣殼蛋白質(zhì)含量。

應(yīng)用：慢病毒載體基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率檢測。

組份

1 each Anti-p24 Coated Plate (96 wells) 抗p24包被板（96孔）

100 μl p24 Control (10 ng/ml)對照

6 ml Lysis Buffer 裂解緩沖液

12 ml Anti-p24 (Biotin Conjugate) 抗p24（生物素）

12 ml Streptavidin HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素

120 ml Wash Buffer (20X) 清洗緩沖液

12 ml TMB Substrate

12 ml Stop Solution 終止液

特點

· ELISA法快速簡便測定病毒滴度

· 收集上清、裂解、結(jié)合、洗滌、測定

· p24衣殼蛋白質(zhì)含量關(guān)聯(lián)病毒滴度

                                                                                                   標(biāo)準(zhǔn)曲線

保存

Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit 所有試劑都保存在2–8°C。

All reagents should be stored at 2–8°C. Do not use reagents beyond the expiration date on the label.

Microtiter Strips. Once opened, microtiter strips may be stored at 2–8°C until the expiration date on the label.Strips must be stored under desiccated conditions. Return unused strips to their original foil pouch along with the sachet of desiccant, and securely reseal the pouch by folding over the open end and securing it with adhesive tape.

Wash Buffer. The working concentration (1X) of wash buffer should not be stored for longer than 3 weeks at 2–8°C. We recommend that fresh wash buffer be prepared before each assay. If the diluted buffer becomes visibly cloudy or develops a precipitate during storage, discard it and prepared fresh buffer.

NOTE: The 20X Wash Buffer normally develops a crystalline precipitate during storage at 2–8°C. This will dissolve upon warming at 37°C.

P24和慢病毒滴度

目前用于研究的重組慢病毒均包含主要的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，包括包膜蛋白質(zhì)、基質(zhì)蛋白質(zhì)、病毒核心蛋白質(zhì)。Gag基因編碼病毒衣殼蛋白質(zhì)（p24）、核衣殼蛋白質(zhì)（p6和p7）和基質(zhì)蛋白質(zhì)（p17）。Clontech Lenti-X p24 Rapid Titer Kit特異性檢測p24衣殼蛋白質(zhì)，p24蛋白質(zhì)含量與病毒滴度相關(guān)聯(lián)。

The Lenti-X p24 Rapid Titer Kit allows you to quickly determine the titer of any HIV-1-based lentiviral supernatant using standard ELISA methods. The wells of the included microtiter plate (12 x 8-well strips) are coated with an anti-HIV-1 p24 capture antibody, which quantitatively binds the HIV-1 p24 in your test samples(p24 is an abundant HIV-1 virus core/capsid protein). Specifically-bound p24 is detected in a typical “sandwich” ELISA format using a biotinylated anti-p24 secondary antibody, a streptavidin-HRP conjugate, and a color producing substrate. Color intensity is measured spectrophotometrically to indicate the level of p24 in the samples, which can then be precisely quantified against a p24 standard curve. p24 values can then be correlated to virus titer of packaging cell supernatants.

Lenti-X p24 Rapid Titer Kit的操作流程是首先裂解培養(yǎng)基上清液中的慢病毒粒子釋放p24蛋白質(zhì)，然后將裂解樣品添加至預(yù)包被鼠源p24抗體的檢測平板中，洗滌移除未結(jié)合的裂解液，采用生物素標(biāo)記的二抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素及顯色劑檢測特異結(jié)合的p24蛋白質(zhì)。本試劑盒包含p24對照用于制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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