本篇教你間充質干細胞培養(yǎng)基該如何制備

　　間充質干細胞(MSCs)是一類具有自我更新和多向分化潛能的細胞，可用于許多治療領域。為了研究和應用這些細胞，需要制備一種適合它們生長和增殖的培養(yǎng)基。以下是制備間充質干細胞培養(yǎng)基的步驟。
 

　　1.培養(yǎng)基配方的確定
 

　　間充質干細胞培養(yǎng)基的組成包括基礎培養(yǎng)液和補充物兩部分。基礎培養(yǎng)液可以選擇DMEM/F12、MEM或α-MEM等，其中含有必要的營養(yǎng)物質和緩沖劑，可以維持MSCs的基本生長需求。補充物可根據不同研究目的進行調整，常見的有10%胎牛血清(FBS)、5-20 ng/ml的人重組FGF、L-抗壞血酸酸鈉(Vc)、牛血清白蛋白(BSA)等。在補充物選擇上，注意避開對細胞有毒的成分。
 

　　2.消毒操作
 

　　將所有耗材(瓶蓋、吸頭、移液管等)在121℃高壓蒸汽下滅菌30min以上，同時將操作臺面、手套、藥品瓶口用70%乙醇擦拭，避免細菌污染。
 

　　3.基礎培養(yǎng)液的配制
 

　　按照培養(yǎng)基配方的要求稱量并加入適量的無菌純水，混合均勻后用0.22um濾器過濾滅菌。
 

　　4.補充物的添加
 

　　將經過消毒和質檢的補充物根據所需比例加入到基礎培養(yǎng)液中，同時通過濾器再次過濾消毒。
 

　　5.調節(jié)pH值
 

　　用NaOH或HCl等調節(jié)劑將培養(yǎng)基的pH值調至7.2-7.4，以確保MSCs在正常生理范圍內生長。
 

　　6.分裝與保存
 

　　將制作好的間充質干細胞培養(yǎng)基分裝到無菌試管或瓶中，密封好后存放于-20℃冰箱中保存。使用前需要先解凍并加入適當的抗生素防止細菌污染。
 

　　總之，制備間充質干細胞培養(yǎng)基需要嚴格遵守消毒操作和培養(yǎng)基配方的要求，以確保培養(yǎng)基質量的穩(wěn)定和可靠性。