關于核酸電泳的原理知識

原理：

凝膠電泳的原理比較簡單。當一種帶電分子放在電場當中時，它們就會以一-定的速度移向適當的電極。帶點分子在電場作用下的移動速度，稱之為電泳遷移率，它同電場的強度和電泳分子本身攜帶的靜電荷數成正比。也就是說，電場強度越大，電泳分子所攜帶的靜電荷越多，其移動速度也就越快，反之則慢。在哪電泳中，使用無反應活性的瓊脂糖與聚丙烯酰胺凝膠作支持介質，從而將電泳分子的對流運動降低到極低，使電泳分子的移動速度與其分子的摩擦系數成反比。已知摩擦系數是分子大小、極性及介質黏度的函數，因此根據分子大小的不同、構型或形狀的差異，以及所帶凈電荷的多寡，便可以通過電泳將核酸或蛋白質分子混合物中的各種成

分彼此分離開來。

凝膠電泳的原理比較簡單。當一種帶電分子放在電場當中時，它們就會以一定的速度移向適當的電極。帶點分子在電場作用下的移動速度，稱之為電泳遷移率，它同電場的強度和電泳分子本身攜帶的靜電荷數成正比。也就是說，電場強度越大，電泳分子所攜帶的靜電荷越多，其移動速度也就越快，反之則慢。在哪電泳中，使用無反應活性的瓊脂糖與聚丙烯酰胺凝膠作支持介質，從而將電泳分子的對流運動降低到極低，使電泳分子的移動速度與其分子的摩擦系數成反比。已知摩擦系數是分子大小、極性及介質黏度的函數，因此根據分子大小的不同、構型或形狀的差異，以及所帶凈電荷的多寡，便可以通過電泳將核酸或蛋白質分子混合物中的各種成分彼此分離開來。

分類：

一.瓊脂凝膠電泳( 分辨DNA范圍為0.2~50kb)

二.聚丙烯酰胺凝膠電泳(分辨范圍為1~1000kb )

三:脈沖電場凝膠電泳( 分離到高達107bp的DNA大分子)

瓊脂糖凝膠電泳是尤為常用的小片段核酸前，用于分離鑒定和純化DNA或RNA。

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一-種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。凝膠的分辨能力同凝膠的類型和濃度有關。分辨DNA范圍0.2~50kb;而要分辨較小分子質量的DNA，則要用聚丙烯酰胺凝膠，其分辨范圍為1~1000bp。凝膠濃度的高低影響凝膠介質孔隙的大小，濃度越高，孔隙越小，其分辨能力也就越強;反之，濃度越低，孔隙就增大，其分辨能力也就越弱。

實驗大致步驟：配膠、EB染色、點樣、電泳、成像拍照、膠圖分析

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