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    轉染試劑盒如何使用才能發揮Z大作用

    更新時間:2017-01-06瀏覽:1818次

    可生物降解的聚合物技術,是一項技術。在此技術的基礎之上,合成了新一代的可生物降解多價陽離子聚合物,以此聚合物作為載體,并成功研發了轉染試劑盒。轉染試劑盒較市場上的其他試劑,具有更高的轉染效率及更低的毒性。轉染試劑盒不但適用于HEK293, COS-7, NIH-3T3, HeLa, CHO等常用細胞系,同樣適用于眾多難轉染的細胞。

     
    轉染試劑盒特點:
    、低毒、廣譜;
    操作簡便;
    化學性質穩定。
     
    轉染試劑盒使用方法
    1、細胞鋪板:
    轉染前18-24小時進行細胞的鋪板,以便在轉染時,貼壁細胞的密度大約在80%左右。
    注:培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。
    2 、轉染試劑盒復合物的制備和轉染的具體方法:
    轉染前將所有試劑置于室溫10分鐘。下面,以轉染35 mm培養皿為例,說明轉染的具體方法(如果在別的培養器皿中進行轉染,各試劑的使用量見表1):
    (1)在轉染前30-60分鐘,將培養液更換成含血清和抗生素的新鮮培養液。
    (2)將1 μg 質粒DNA稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM,用移液槍吹吸3-4次。
    (3)將3 μL HighMax轉染試劑稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM,用移液槍吹吸3-4次。
    注:不能使用含血清的培養基進行DNA和轉染試劑盒的稀釋!因為轉染試劑盒轉染復合物的形成過程不能含有血清。
    (4)將稀釋好的轉染試劑盒一次性全部加入到已稀釋好的質粒DNA中,立即用移液槍吹吸3-4次。
    注:此混合的順序不能反向進行!
    (5)室溫放置10-15分鐘,以形成轉染試劑盒復合物。
    (6)將上述100 μL 轉染試劑盒轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動培養皿,讓轉染試劑盒復合物分散均勻。
    (7)轉染后12-18小時,去除含轉染試劑盒復合物的培養液,加入含血清和抗生素的新鮮培養液。
    (8)24-48小時后檢測轉染的效率。

     

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